SciELO - Scientific Electronic Library Online

 
vol.24 número3-4Un caso de anisakiosis en un adultoDistribución y tendencia de la fasciolosis en ganado de abasto en Chile, 1989-1995 índice de autoresíndice de materiabúsqueda de artículos
Home Pagelista alfabética de revistas  

Parasitología al día

versión impresa ISSN 0716-0720

Parasitol. día v.24 n.3-4 Santiago jul. 2000

http://dx.doi.org/10.4067/S0716-07202000000300008 

 

La coloración fluorescente con naranja de acridina y el PAP: validación de ambas técnicas para la detección de Trichomonas vaginalis

SIXTO RAUL COSTAMAGNA*; MARIA PRADO FIGUEROA*; OSCAR SORIA**; ALEJANDRO FUENTES ** y RICARDO FERREYRA**.

FLUORESCENT STAINING WITH ACRIDINE ORANGE AND PAP
SMEAR: VALIDATION TESTS OF BOTH TECNIQUES FOR THE
DETECTION OF Trichomonas vaginalis

The present study examined the validity of PAP staining, as used for vaginal cytology, against fluorescent staining with acridine orange in order to determine the value of a negative result of Trichomonas vaginalis obtained by a PAP smear. We examined eighty vaginal-secretion samples from 18- to 45-year-old female patients of the Hospital Municipal of the city of Bahía Blanca, Province of Buenos Aires, Argentina. The samples were stained in parallel by the PAP smear technique and the fluorescent staining technique with acridine orange described by Fripp in 1975. The results of our validation tests demonstrated that, against fluorescent staining with acridine orange, the PAP smear has a 54.5% sensitivity for the detection of T. vaginalis for a 13.75% prevalence of disease among the females in the study with a 95% confidence level. In assays conducted "in parallel" for both stainings, the global value of the test was 93.8%, with a predictive negative value of 93.2%. We conclude that, although the PAP smear can detect T. vaginalis, its sensitivity is not high enough for the test to be used as the sole diagnostic means and the test must always be supplemented with fluorescent staining with acridine orange or another test of similar value. Otherwise, the diagnostic sensitivity would not be any higher than that of vaginal discharge exams in vitro.

Key words: Trichomonosis; Trichomonas vaginalis; Acridine orange; Papanicolaou.

INTRODUCCION

La trichomonosis es una de las ETS más distribuidas en todo el mundo, frecuente en todas las razas y continentes, con mayor incidencia entre mujeres de 16 a 35 años1 y cuyo agente etiológico es el flagelado Trichomonas vaginalis2 parásito obligado del ser humano.

Con el objeto de satisfacer consultas efectuadas a los autores por médicos ginecólogos, patólogos y bioquímicos, respecto de la sensibilidad de los diferentes métodos para el diagnóstico por el laboratorio de trichomonosis y continuando con la validación de técnicas de coloración para la detección de T. vaginalis en flujo vaginal,3 en esta experiencia validamos la coloración fluorescente con naranja de acridina4 y la tinción de Papanicolaou, usada en el estudio de la citología vaginal.5

MATERIAL Y METODOS

Se estudiaron 80 muestras de flujo vaginal de mujeres cuyas edades oscilaban entre los 18 y 45 años, concurrentes al servicio de consultorios externos de Ginecología del Hospital Municipal "Dr. Leónidas Lucero" de la ciudad de Bahía Blanca.

La toma de muestras de flujo vaginal se realizó como habitualmente se hace para estudios de citología exfoliativa y fueron extraídas por médicos ginecólogos, quienes efectuaron los correspondientes extendidos en portaobjetos, los cuales fueron remitidos para su procesamiento posterior al servicio de Anatomía Patológica del Hospital Municipal de Agudos "Dr. Leónidas Lucero" donde un médico patólogo efectuó los exámenes de Papanicolaou, mientras que la coloración fluorescente con el naranja de acridina fue realizada en la cátedra de Parasitología Clínica de la Universidad Nacional del Sur.

La coloración para PAP fue la utilizada rutinariamente para los estudios de citología exfoliativa.5

La coloración fluorescente con naranja de acridina utilizada fue la descrita por Fripp y col.4

Para el análisis de los resultados se utilizó el software EPIDAT (Análisis Epidemiológico de Datos Tabulados), versión 2.0 para Windows, de junio de 1997, OPS-OMS.

RESULTADOS Y DISCUSION

Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 1. Analizados estos datos, para un nivel de confianza de 95%, y tomando como referencia la coloración fluorescente con el naranja de acridina, para ensayos "en paralelo", es decir que a los sujetos clasificados como negativos en la prueba anterior (en este caso a todos los PAP) se les efectuó coloración con naranja de acridina, se obtuvieron los resultados que se muestran en la Tabla 2.

 

Tabla 1: Resultados en el diagnóstico de
Trichomonas vaginalis obtenidos al procesar
muestras de flujo vaginal con coloración
fluorescente con naranja de acridina 
(NA) o PAP 

Positivos con PAP  6
Positivos con NA 11 
Positivos con NA y negativos con PAP 5
Positivos con PAP y negativos con NA 0
Negativos con PAP y positivos con NA 5
Positivos con ambos métodos 6
Negativos por ambos métodos 690

 

Tabla 2: Resultados en el diagnóstico de
Trichomonas vaginalis en ensayos en paralelo, 
con NA y PAP 

Sensibilidad 54,5%
Especificidad 100,0%
Valor Predictivo del Resultado Positivo 100,0%
Valor Predictivo del Resultado Negativo 93,2%
Valor global de la prueba 93,8%

La prevalencia de T. vaginalis en el grupo estudiado fue 13,75%.

Nuestros resultados, respecto de la sensibilidad del PAP comparado con la coloración fluorescente con el naranja de acridina son coincidentes con los de Mason6 quien obtiene una sensibilidad del 52% para el PAP, pero son mayores a los de Pérez y col,7 quienes detectan por citología el 23,7% de los casos.

Kireger,8 también coincidentemente con nosotros sugiere esperar el resultado del PAP antes de solicitar la investigación de T. vaginalis por otros métodos, es decir, efectuar las pruebas "en paralelo". Okuyama9 propone la hibridización "in situ" para todos los PAPs que arrojaren resultados negativos, con resultados importantes, pero nuestra realidad hace que aún sea imposible efectuar estos estudios en la práctica diaria, por una razón de costo/beneficio.  
  Si comparamos los resultados obtenidos con el PAP en este estudio, y lo que obtuvimos en un estudio comparativo entre el examen en fresco y la coloración fluorescente con el naranja de acridina,3 pese a que se trata de muestras diferentes y prevalencias ligeramente distintas, es pertinente hacer notar que las sensibilidades diagnósticas de ambos métodos, comparados con una misma técnica de referencia (coloración fluorescente con naranja de acridina), son prácticamente iguales: 58,3% para el examen en fresco y 54,5% para el PAP, por lo que estos resultados no modifican el algoritmo ya recomendado por nosotros.3

Luego del análisis de los resultados obtenidos, concluimos, que no es recomendable utilizar al PAP como único método para investigar T. vaginalis ya que presenta una sensibilidad diagnóstica baja: 54,5%, comparado con la coloración fluorescente con el naranja de acridina. Es importante que el médico solicitante conozca estos resultados, ya que, para una prevalencia de enfermedad del 13,75%, prácticamente la mitad de los diagnósticos son falsamente negativos (5 de 11, según nuestras experiencias).

RESUMEN

Se efectuó la validación de la coloración de Papanicolaou, utilizada para citología vaginal, frente a la coloración fluorescente con naranja de acridina, a fin de evaluar el valor de un resultado negativo para Trichomonas vaginalis obtenido en un PAP.

Se estudiaron 80 muestras de flujo vaginal de mujeres entre 18 y 45 años, pacientes de consultorios externos de Ginecología del Hospital Municipal de la ciudad de Bahía Blanca, Provincia de Buenos Aires (Argentina). Las muestras se colorearon paralelamente por la técnica de Papanicolaou y por la coloración fluorescente con naranja de acridina.

Los resultados mostraron que el PAP presenta una sensibilidad del 54,5% para la detección de T. vaginalis, validación efectuada frente a la coloración fluorescente con naranja de acridina, para una prevalencia de enfermedad en el grupo de mujeres estudiadas del 13,75% y un nivel de confianza del 95%. Para ensayos "en paralelo" con ambas coloraciones, el valor global de la prueba fue del 93,8%, con un valor predictivo del resultado negativo del 93,2%.

Concluimos que si bien T. vaginalis es detectada en el PAP, éste no presenta sensibilidad significativamente elevada como para ser considerada como única prueba, debiéndose complementar siempre con una coloración fluorescente con naranja de acridina, u otra prueba de similar valor.

* Cátedra de Parasitología Clínica. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia. Universidad Nacional del Sur. San Juan 670 (8000) Bahía Blanca Argentina. E-mail: rcostama@criba.edu.ar
** Hospital Municipal de Agudos "Dr. Leónidas Lucero" Bahía Blanca Argentina.

REFERENCIAS

1.- BENENSON A. El control de las enfermedades transmisibles en el hombre. Publicación científica Nro. 538. OPS-OMS. Washington DC EUA, 1992.         [ Links ]

2.- DONNÉ A. Animalcules observés dans les matieres purulentes et le produit des sécretions des organes genitaux de l'homme et de la femme. Comptes rendus hebdomadaires des séances de l'Academie des Sciences, Paris 1836; 3: 385.         [ Links ]

3.- COSTAMAGNA S R, VAYLET S, PRADO et al. Trichomonosis: validación de tres pruebas para el diagnóstico por el laboratorio de análisis. Parasitol al Día 1997; 21: 61-5.         [ Links ]

4.- FRIPP P J, MASON P R, SUPER H. A method for the diagnosis of Trichomonas vaginalis using acridine orange. J Parasitol 1975; 61: 966-7.         [ Links ]

5.- PAPANICOLAOU G N, WOLINSKA W H. Vaginal cytology in Trichomonas infestation. Int Rec Med 1995; 168: 551-6.         [ Links ]

6.- MASON P R, HEATHER S, FRIPP P J. Comparison of four techniques for the routine diagnosis of Trichomonas vaginalis infection. J Clin Path 1976; 29:154-7.         [ Links ]

7.- PEREZ DEL MOLINO B M I. Estudio comparativo de diferentes técnicas para el diagnóstico de las cervicovaginitis por Trichomonas vaginalis y Cándida albicans. Anal Clin 1986; 43: 147-1.         [ Links ]

8.- KRIEGER J. Diagnosis of Trichomoniasis. JAMA 1988; 259: 1223-7.         [ Links ]

9.- OKUYAMA T, TAKAHASHI R, MORI M et al Polymerase chain reactrion amplification of Trichomonas vaginalis DNA from Papanicolaou-stained smears. Diagn Cytopathol 1998; 19(6):437-40.         [ Links ]