Resumo

ALVAREZ, Maricel; HARTEL, Steffen; GODOY, Roberto  e  HEYSER, Wolfgang. NUEVAS PERSPECTIVAS EN LA DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD DE LA FOSFATASA EN ECTOMICORRIZAS DE NOTHOFAGUS OBLIQUA EN BOSQUES DEL SUR DE CHILE. Gayana Bot. [online]. 2003, vol.60, n.1, pp. 41-46. ISSN 0717-6643.  doi: 10.4067/S0717-66432003000100007.

Nosotros presentamos un método basado en la microscopía confocal de fluorescencia y en el análisis de imágenes, para localizar y cuantificar la actividad de la fosfatasa superficial (SBPA) en hongos ectomicorrícicos y en ectomicorrizas de Nothofagus obliqua (Mirb.) Oerst. El sustrato ELF-97 es hidrofílico, el cual se desarrolla en un precipitado altamente fluorescente bajo su activación a través de fosfomonoesterasas. Recientemente esta técnica ha sido aprobada mediante comparaciones con un método estándar (fosfato de p-nitrofenilo) realizadas en micelio fúngico. La técnica microscópica con ELF-97 reveló que Paxillus involutus (Batsch: Fr.) Sing. y Austropaxillus boletinoides (Sing.) Brsky. & Jarosch poseen diferentes estrategias de adaptación frente a distintas concentraciones de fosfatos y pH (3-7). Nosotros analizamos la SBPA en cuatro asociaciones micorrícicas de N. obliqua y encontramos que la organización del manto juega un rol esencial con respecto a la SBPA. En general, las raíces micorrizadas transfieren la SBPA de la raíz hacia el manto. En este contexto, Pisolithus tinctorius (Pers.) Coker & Couch demostró ser el hongo ectomicorrícico más relevante para N. obliqua, al incrementar significativamente el total de la SBPA de la micorriza en relación a la raíz sin micorrizar. En conclusión, a través de la microscopía confocal de fluorescencia basada en el sustrato ELF-97 y su combinación con el procesamiento de imágenes es posible, tanto en hongos micorrícicos como en micorrizas, determinar la SBPA y revelar las estrategias de adaptación con respecto al fósforo (P) a un nivel fisiológico-estructural

Palavras-chave : Actividad fosfatasa; ectomicorrizas; ELF-97; microscopía confocal; microscopía cuantitiva de fluorescencia.